Phenyl -Sepharose CL-4B-蛋白纯化-试剂-生物在线
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Phenyl -Sepharose CL-4B

Phenyl -Sepharose CL-4B

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产品名称: Phenyl -Sepharose CL-4B

英文名称: Phenyl -Sepharose CL-4B

产品编号: S9250

产品价格: 0

产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三层

品牌商标: solarbio

更新时间: 2025-12-22T13:21:18

使用范围: null

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苯基-琼脂糖凝胶CL-4B

品牌:Solarbio | 货号:S9250 | CAS:

 

  • 英文名称 : Phenyl-Sepharose CL-4B
  • 储存条件 : 4-28℃
  • 外观(性状) : 颗粒
  • 单位 : 瓶
 

 

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商品货号: 商品品牌: 规格 基本售价: 选择规格
S9250-25ml Solarbio 25ml 960.00元

一、简介

苯基-琼脂糖凝胶CL-4B是将苯基键合在琼脂糖凝胶CL-4B上形成的一种可利用疏水相互作用来实现目标产品 纯化分离的疏水类介质。用于生物大分子和乙肝疫苗的纯化分离。

本品呈白色,球状、无嗅、无味、无肉眼可见杂质。

二、亲和填料特性

项 目 指标
 基质   4% 交联琼脂糖
  形状  球形
 粒径   45~165 μm
 蛋白质吸附容量(HSA)  36mg/ml(高);24mg/ml(低) 
 *高流速(25℃)   100KPa 下 150 cm/h *
 耐压   0.15 MPa
 工作温度   4~40℃
 pH 适用范围    3~12(短时间 ,在位清洗);4~12(长时间)
 配基   R-OCH2-CH(OH)-CH2-O-C6H5
 化学稳定性 以下溶液中稳定:                                                                           1mol/L NaOH;70%EtOH;30%异丙醇;0.5%SDS; 6mol/L 盐酸胍;8mol/L 尿素;3 mol/L(NH4)2SO4

 *柱子:内径16mm、柱长10cm,柱床高5cm,25℃,流动相为0.1mol/LNaCl

三、 适用范围

苯基-琼脂糖凝胶 CL-4B是一种疏水层析介质,利用样品中组分疏水性的不同进行分离。用于生物大分子的纯 化分离。

 四、保存条件

产品应密封贮存在 4℃~30℃(保存溶液为 20% 乙醇+0.1M 醋酸钠),通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。 用过的柱子贮存在 4℃(20% 乙醇)。

保质期:5 年。

五、操作步骤:

1、装柱

(1)让所有的材料和试剂达到室温。配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液。

(2)根据柱子大小取所需量的凝胶,清洗掉 20%乙醇,抽干,用初始缓冲液(按凝胶:缓冲液=3:1 的比例) 配成匀浆。

(3)将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。

(4)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内 自由沉降,连结好柱子顶端柱头。

(5)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过,使柱床稳定。用 2~3 倍柱体积的缓冲液平 衡柱子。

2、平衡

让平衡缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和 pH 不变。平衡缓冲液一般是高盐浓度的缓冲液,如 0.02~0.05mol/L 的 PBS 加 1~2.5mol/L(NH4)2SO4 等。

3、上样

(1)样品用平衡液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。

(2)一般情况是让目标产品结合在柱子上,用平衡液洗去杂质,再选择一种洗脱液洗下目标产品。

(3)介质对样品组分吸附的程度取决于样品的疏水性质、流动相的离子强度和温度。盐浓度大、温度高或 样品组分疏水性强,介质对组分吸附牢。

4、洗脱

疏水介质可用减小盐浓度进行洗脱。加表面活性剂或有机溶剂可加强洗脱。*常用的洗脱液是低盐浓度缓冲 液,如 0.02~0.05mol/L 的 PBS。

5、再生

一般用低盐浓度的缓冲液洗,洗 10 倍以上柱体积,接着用结合蛋白的平衡液洗到平衡,可再次使用。 若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。

6、在位清洗

(1)对于以离子键结合上去的蛋白,可以用 2M Nacl 去除。

(2)对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类,可用 1M NaOH 去除。

(3)对强疏水性结合的蛋白、脂类等,用 4~10 倍柱体积的 70%乙醇或 30%异丙醇清洗,但要注意有机溶剂 的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。 清洗完毕后,用至少 3 倍缓冲液平衡柱子。

7、注意

在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干,气泡进入。

8、去热源

用 0.5M 的氢氧化钠清洗柱子 5~6 小时或用 0.1M 的氢氧化钠 24 小时。或用以下方法步骤去除:

(1)2 倍柱体积的 70%乙醇;

(2)2 倍柱体积 50mM Tris-HCl pH7.5;

(3)1 倍柱体积 4M 尿素;

(4)3 倍柱体积的 Tris 缓冲液+0.1M Nacl; 以上缓冲液都在无热源的双蒸水中配制。

9、 消毒

用 0.5~1M NaOH 室温下洗 8~10 倍柱体积,初始缓冲液平衡柱子。

 

D8240 Dextran T-10  葡聚糖 T-10 Pharmacia 10g

D8250 Dextran T-40  葡聚糖 T-40 Pharmacia 10g

D8260 Dextran T-70  葡聚糖 T-70 Pharmacia 10g

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D8290 Dextran Blue 2000  蓝色葡聚糖 2000 Pharmacia 1g

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S8140 Sephadex G-25 medium(葡聚糖凝胶G-25) Pharmacia 25g

S8150 Sephadex G-50 medium(葡聚糖凝胶G-50) Pharmacia 25g

S8160 Sephadex G-75 medium(葡聚糖凝胶G-75) Pharmacia 25g

S8170 Sephadex G-100 medium(葡聚糖凝胶G-100) Pharmacia 25g

S8110 Sephadex LH-20 (葡聚糖凝胶LH-20) Pharmacia 25g