Phenyl -Sepharose CL-4B
产品名称: Phenyl -Sepharose CL-4B
英文名称: Phenyl -Sepharose CL-4B
产品编号: S9250
产品价格: 0
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三层
品牌商标: solarbio
更新时间: 2025-12-22T13:21:18
使用范围: null
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苯基-琼脂糖凝胶CL-4B
品牌:Solarbio | 货号:S9250 | CAS:
- 英文名称 : Phenyl-Sepharose CL-4B
- 储存条件 : 4-28℃
- 外观(性状) : 颗粒
- 单位 : 瓶
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| 商品货号: | 商品品牌: | 规格 | 基本售价: | 选择规格 |
|---|---|---|---|---|
| S9250-25ml | Solarbio | 25ml | 960.00元 |
一、简介
苯基-琼脂糖凝胶CL-4B是将苯基键合在琼脂糖凝胶CL-4B上形成的一种可利用疏水相互作用来实现目标产品 纯化分离的疏水类介质。用于生物大分子和乙肝疫苗的纯化分离。
本品呈白色,球状、无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
二、亲和填料特性
| 项 目 | 指标 |
| 基质 | 4% 交联琼脂糖 |
| 形状 | 球形 |
| 粒径 | 45~165 μm |
| 蛋白质吸附容量(HSA) | 36mg/ml(高);24mg/ml(低) |
| *高流速(25℃) | 100KPa 下 150 cm/h * |
| 耐压 | 0.15 MPa |
| 工作温度 | 4~40℃ |
| pH 适用范围 | 3~12(短时间 ,在位清洗);4~12(长时间) |
| 配基 | R-OCH2-CH(OH)-CH2-O-C6H5 |
| 化学稳定性 以下溶液中稳定: | 1mol/L NaOH;70%EtOH;30%异丙醇;0.5%SDS; 6mol/L 盐酸胍;8mol/L 尿素;3 mol/L(NH4)2SO4 |
*柱子:内径16mm、柱长10cm,柱床高5cm,25℃,流动相为0.1mol/LNaCl
三、 适用范围
苯基-琼脂糖凝胶 CL-4B是一种疏水层析介质,利用样品中组分疏水性的不同进行分离。用于生物大分子的纯 化分离。
四、保存条件
产品应密封贮存在 4℃~30℃(保存溶液为 20% 乙醇+0.1M 醋酸钠),通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。 用过的柱子贮存在 4℃(20% 乙醇)。
保质期:5 年。
五、操作步骤:
1、装柱
(1)让所有的材料和试剂达到室温。配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液。
(2)根据柱子大小取所需量的凝胶,清洗掉 20%乙醇,抽干,用初始缓冲液(按凝胶:缓冲液=3:1 的比例) 配成匀浆。
(3)将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。
(4)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内 自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
(5)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过,使柱床稳定。用 2~3 倍柱体积的缓冲液平 衡柱子。
2、平衡
让平衡缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和 pH 不变。平衡缓冲液一般是高盐浓度的缓冲液,如 0.02~0.05mol/L 的 PBS 加 1~2.5mol/L(NH4)2SO4 等。
3、上样
(1)样品用平衡液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。
(2)一般情况是让目标产品结合在柱子上,用平衡液洗去杂质,再选择一种洗脱液洗下目标产品。
(3)介质对样品组分吸附的程度取决于样品的疏水性质、流动相的离子强度和温度。盐浓度大、温度高或 样品组分疏水性强,介质对组分吸附牢。
4、洗脱
疏水介质可用减小盐浓度进行洗脱。加表面活性剂或有机溶剂可加强洗脱。*常用的洗脱液是低盐浓度缓冲 液,如 0.02~0.05mol/L 的 PBS。
5、再生
一般用低盐浓度的缓冲液洗,洗 10 倍以上柱体积,接着用结合蛋白的平衡液洗到平衡,可再次使用。 若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
6、在位清洗
(1)对于以离子键结合上去的蛋白,可以用 2M Nacl 去除。
(2)对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类,可用 1M NaOH 去除。
(3)对强疏水性结合的蛋白、脂类等,用 4~10 倍柱体积的 70%乙醇或 30%异丙醇清洗,但要注意有机溶剂 的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。 清洗完毕后,用至少 3 倍缓冲液平衡柱子。
7、注意
在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干,气泡进入。
8、去热源
用 0.5M 的氢氧化钠清洗柱子 5~6 小时或用 0.1M 的氢氧化钠 24 小时。或用以下方法步骤去除:
(1)2 倍柱体积的 70%乙醇;
(2)2 倍柱体积 50mM Tris-HCl pH7.5;
(3)1 倍柱体积 4M 尿素;
(4)3 倍柱体积的 Tris 缓冲液+0.1M Nacl; 以上缓冲液都在无热源的双蒸水中配制。
9、 消毒
用 0.5~1M NaOH 室温下洗 8~10 倍柱体积,初始缓冲液平衡柱子。
D8240 Dextran T-10 葡聚糖 T-10 Pharmacia 10g
D8250 Dextran T-40 葡聚糖 T-40 Pharmacia 10g
D8260 Dextran T-70 葡聚糖 T-70 Pharmacia 10g
D8270 Dextran T-500 葡聚糖 T-500 Pharmacia 10g
D8290 Dextran Blue 2000 蓝色葡聚糖 2000 Pharmacia 1g
G8831 β-Dextranase β-葡聚糖酶 solarbio 5g
D8300 DEAE Sephadex A-25 Pharmacia 25g
S9130 DEAE Sephadex A-50 Pharmacia 25g
S8120 Sephadex G-10 medium(葡聚糖凝胶G-10) Pharmacia 25g
S8130 Sephadex G-15 medium(葡聚糖凝胶G-15) Pharmacia 25g
S8140 Sephadex G-25 medium(葡聚糖凝胶G-25) Pharmacia 25g
S8150 Sephadex G-50 medium(葡聚糖凝胶G-50) Pharmacia 25g
S8160 Sephadex G-75 medium(葡聚糖凝胶G-75) Pharmacia 25g
S8170 Sephadex G-100 medium(葡聚糖凝胶G-100) Pharmacia 25g
S8110 Sephadex LH-20 (葡聚糖凝胶LH-20) Pharmacia 25g
